Bst 2.0 DNA Polymerase (Bebas Gliserol, Kapadhetan dhuwur)
Bst DNA polymerase V2 asalé saka Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, sing nduweni aktivitas polimerase DNA 5′→3′ lan aktivitas penggantian rantai sing kuwat, nanging ora ana aktivitas exonuclease 5′→3′.Bst DNA Polymerase V2 saenipun cocok kanggo strand-pamindahan, isothermal amplifikasi LAMP (Loop mediated isothermal amplification) lan urutan cepet.Bst DNA polymerase V2 iki bisa nyandhet aktivitas DNA polimerase ing suhu kamar, supaya bisa dioperasikake lan sistem reaksi bisa diformulasikan ing suhu kamar, nyegah amplifikasi non-spesifik lan ningkatake efisiensi reaksi, lan versi iki bisa dadi lyophilized.Kajaba iku, bisa ngeculake aktivitas ing suhu sing luwih dhuwur, saéngga ngilangi kabutuhan langkah aktivasi sing kapisah.
Komponen
| Komponen | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA polimerase V2 (Bebas Gliserol) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| 10×HC Bst V2 Buffer | 1,5 ml | 2 × 1,5 ml | 3 × 10 ml |
| MgSO4 (100mM) | 1,5 ml | 2 × 1,5 ml | 2 × 10 ml |
Aplikasi
1.amplifikasi isotermal LAMP
2.Reaksi perpindahan tunggal untai DNA
3.Urutan gen GC dhuwur
4.Urutan DNA tingkat nanogram.
Kondisi panyimpenan
Transportasi ing ngisor 0 ° C lan disimpen ing -25 ° C ~ -15 ° C.
Definisi Unit
Siji unit ditetepake minangka jumlah enzim sing nggabungake 25 nmol dNTP dadi bahan sing ora larut asam sajrone 30 menit ing suhu 65 ° C.
Reaksi LAMP
| Komponen | 25 μLSistem |
| 10×HC Bst V2 Buffer | 2,5 l |
| MgSO4 (100mM) | 1,5 μl |
| dNTP (masing-masing 10mM) | 3,5 l |
| SYTO™ 16 Ijo (25×)a | 1,0 l |
| Campuran primerb | 6 μl |
| Bst DNA Polimerase V2 (Bebas Gliserol) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Cithakan | × μL |
| ddH₂O | Iki 25 μL |
Cathetan:
1) a.SYTOTM 16 Ijo (25 ×): Miturut kabutuhan eksperimen, pewarna liyane bisa digunakake minangka pengganti;
2) b.Campuran primer: dipikolehi kanthi nyampur 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB lan volume liyane.
Reaksi lan Kondisi
1 × HC Bst V2 Buffer, suhu inkubasi antara 60°C lan 65°C.
Inactivation panas
80°C, 20 menit.
