Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Katrangan
Cat Nomer: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix minangka Kit PCR kuantitatif multiplex adhedhasar RNA minangka cithakan.Ing eksperimen, transkripsi terbalik lan PCR kuantitatif ditindakake ing tabung reaksi sing padha, nyederhanakake operasi eksperimen lan nyuda resiko kontaminasi.Desain unik saka campuran buffer lan enzim bisa digunakake ing sistem lyophilized siji-langkah.Kit kasebut nggunakake Transcriptase Reverse tahan panas kanggo sintesis cDNA untaian pertama sing efisien nggunakake Hotstart Taq DNA Polymerase kanggo amplifikasi kuantitatif.Isine buffer reaksi sing dioptimalake, campuran enzim lan liya-liyane, lan faktor sing efektif nyandhet amplifikasi PCR non-spesifik lan nambah efisiensi amplifikasi saka pirang-pirang reaksi qPCR sing ditambahake, mbisakake sawetara amplifikasi kuantitatif fluoresensi nalika njamin efisiensi amplifikasi primer.
Komponen
jeneng |
1. Lyo-buffer |
2. Campuran Lyo-Enzim |
3. Lyo pangayoman |
Kondisi transportasiion
A: Lyo-buffer lan protectant: -25 ~ -15 ℃, urip beting 1 taun.
B: Campuran Lyo-enzim, 2-8 ℃, umur simpan 6 wulan.
Instruksi kanggo operasi
1. Sistem Reaksi (Contoh 25μL)
Komponen | Volume (μL) | Konsentrasi pungkasan |
Lyo-Buffer | 6 | 1* |
Campuran Lyo-enzim | 1 | - |
Lyo-Protectant | 8 | - |
Campuran Primer (10μM) | 1 | 0.1-1uM |
Campuran Probe (10μM) | 0.5 | 0,05-0,5uM |
Cithakan RNA | 5 | - |
DEPC H2O | Nganti 25 | - |
2. Optimized Cycling Protocol
1) Standar Cycling Protokol
Tahap reaksi | Suhu | Wektu | Sepeda; Pit; ontel | |
1 | Transkripsi mbalikke | 50°Ca | 10 min | 1 |
2 | Denaturasi wiwitan | 95°C | 5 min | 1 |
3 | Reaksi amplifikasi | 95°C | 15 sek | 45 siklus |
60°Cb | 30 detikc |
2) Protokol Cepet Cycling
| Tahap reaksi | Suhu | Wektu | Sepeda; Pit; ontel |
1 | Transkripsi mbalikke | 50°Ca | 2 min | 1 |
2 | Denaturasi wiwitan | 95°C | 2 sek | 1 |
3 | Reaksi amplifikasi | 95°C | 1 sek |
45 siklus |
60°Cb | 13 sekc |
Cathetan:
a) mbalikke transkripsi: Suhu bisa milih 42°C utawa 50°C kanggo 10-15 menit.
b) Reaksi amplifikasi: Suhu diatur miturut nilai Tm saka primer sing dirancang.
c)Fluoresensi sinyal disualekno: Mangga atur prosedur eksperimen miturut syarat-syaratmanual instrumen.
Informasi Teknis/Spesifikasi
Wiwitan Panas | Dibangun ing wiwitan panas |
Metode deteksi | Deteksi primer-probe |
metode PCR | Siji langkah RT-qPCR |
Jinis sampel | RNA |
Cathetan
1. Produk iki mung kanggo riset.
2. Mangga nganggo APD sing dibutuhake, jas lab lan sarung tangan, kanggo njamin kesehatan lan safety!