Nuklease Ultra
UltraNuclease minangka rekayasa genetika endonuclaese sing asalé saka Serratia marcescens, sing bisa ngrusak DNA utawa RNA, untai ganda utawa tunggal, linier utawa bunder ing macem-macem kondisi, ngrusak asam nukleat kanthi lengkap dadi oligonukleotida 5'-monophosphate kanthi dawa 3-5 basa. .Sawise modifikasi rekayasa genetika, produk kasebut difermentasi, diekspresikan, lan diresiki ing Escherichia coli (E. coli), sing nyuda viskositas supernatan sel lan riset ilmiah lisat sel, nanging uga nambah efisiensi pemurnian lan riset fungsional protein.Bisa uga digunakake ing terapi gen, pemurnian virus, produksi vaksin, protein lan industri farmasi polisakarida minangka reagen penghapus asam nukleat inang.
Fitur produk
| Nomer CAS | 9025-65-4 |
| Nomer EC | |
| Bobot Molekul | 30kDa |
| Titik Isoelektrik | 6.85 |
| Kemurnian Protein | ≥99%（ SDS-PAGE & SEC-HPLC） |
| Kegiatan Khusus | ≥1.1×106U/mg |
| Suhu paling optimal | 37°C |
| pH optimal | 8.0 |
| Aktivitas Protease | negatif |
| Beban hayati | <10CFU/100.000U |
| Sisa Protein Sel Inang | ≤10ppm |
| Heavy Metal | ≤10ppm |
| Bakteri Endotoksin | <0.25EU/1000U |
| Panyimpenan Buffer | 20mM Tris-HCl, pH 8,0, 2mM MgCl2 , 20mM NaCl, 50% Gliserol |
Kondisi panyimpenan
≤0°C transportasi;-25~-15°C Storage，2 taun validitas (supaya pembekuan-thawing).
Definisi Unit
Jumlah enzim sing digunakake kanggo ngganti nilai panyerepan △A260 kanthi 1,0 sajrone 30 menit ing 37 °C, pH 8,0, padha karo DNA sperma salmon 37μg sing dicerna kanthi nglereni dadi oligonukleotida, ditetepake minangka unit aktif (U).
Kontrol kualitas
Sisa Protein Sel Inang: ELISA kit
•Protease Sisa: 250KU/mL UltraNuclease bereaksi karo substrat sajrone 60 menit, ora ana aktivitas sing dideteksi.
•Bakteri Endotoksin: LAL-Test, Pharmacopoeia of the People's Republic of China Volume 4 (2020 Edition) metode tes watesan gel.Aturan Umum (1143).
•Bioburden: Pharmacopoeia Republik Rakyat China Volume 4 (Edisi 2020)— Umum
Aturan kanggo Test Sterility (1101), Standar Nasional PRC, GB 4789.2-2016.
•Logam abot:ICP-AES, HJ776-2015.
Operasi
Aktivitas UltraNuclease dicegah sacara signifikan nalika konsentrasi SDS luwih saka 0.1% utawa EDTA
konsentrasi luwih saka 1mM. Surfaktan Triton X- 100, Tween 20 lan Tween 80 ora duwe pengaruh marang nuklease
sifat nalika konsentrasi ana ing sangisore 1,5%.
| Operasi | Operasi Optimal | Operasi sing sah |
| Suhu | 37 ℃ | 0-45 ℃ |
| pH | 8.0-9.2 | 6.0-11.0 |
| Mg2+ | 1-2mM | 1-15mM |
| DTT | 0-100mM | > 100mM |
| 2-Mercaptoethanol | 0-100mM | > 100mM |
| Ion logam monovalen (Na+, K+ etc.) | 0-20mM | 0-200mM |
| PO43- | 0-10mM | 0-100mM |
Panggunaan lan Dosis
• Mbusak asam nukleat eksogen saka produk vaksin, ngurangi risiko keracunan asam nukleat residual lan ningkatake safety produk.
• Ngurangi viskositas cairan feed sing disebabake dening asam nukleat, nyepetake wektu pangolahan lan nambah asil protein.
• Copot asam nukleat sing mbungkus partikel (virus, badan inklusi, lsp), sing kondusif
kanggo release lan purifikasi saka partikel.
| Tipe Eksperimental | Produksi Protein | Virus, Vaksin | Obat Sel |
| Nomer Sel | 1 g bobot basah sel (resuspended karo buffer 10ml) | 1 L fermentasi supernatan cair | 1 L kultur |
| Dosis minimal | 250U | 100U | 100U |
| Dianjurake Dosis | 2500U | 25000U | 5000U |
• Perawatan nuklease bisa ningkatake resolusi lan pemulihan sampel kanggo kromatografi kolom, elektroforesis lan analisis blotting.
• Ing terapi gen, asam nukleat dibusak kanggo njupuk virus adeno-related dimurnèkaké.
