2×PCR Master Mix (tanpa Pewarna)
PCR Master Mix minangka solusi premixed PCR konvensional sing siap digunakake, kalebu Taq DNA Polymerase, dNTP campuran MgCl2 lan buffer sing dioptimalake.Sajrone reaksi, mung sepisanan lan cithakan sing bisa ditambahake kanggo amplifikasi, sing bisa nyederhanakake langkah-langkah operasi eksperimen.Produk iki ngemot stabilisator sing apik banget lan bisa disimpen nganti 3 wulan ing suhu 4 ℃.Produk PCR duwe tonjolan 3′-dA lan bisa gampang dikloning dadi vektor T.
Kahanan Panyimpenan
Produk kudu disimpen ing -25 ℃ ~ -15 ℃ kanggo rong taun.
Spesifikasi
| Fidelity (vs.Taq) | 1× |
| Wiwitan Panas | No |
| Overhang | 3'-A |
| Polimerase | Taq DNA Polimerase |
| Format Reaksi | SuperMix utawa Master Mix |
| Kacepetan Reaksi | Standar |
| Jinis produk | Campuran Master PCR (2×) |
instruksi
1.Sistem Reaksi
| Komponen | Ukuran (L) |
| Cithakan DNA | Cocok |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR Master Campuran | 25 |
| ddH2O | Kanggo 50 |
2.Protokol Amplifikasi
| Siklus langkah | Suhu (°C) | Wektu | Siklus |
| Pra-denaturasi | 94 ℃ | 5 menit | 1 |
| Denaturasi | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
| Annealing | 50-60 ℃ | 30 sek | |
| Ekstensi | 72 ℃ | 30-60 sec/kb | |
| Ekstensi Akhir | 72 ℃ | 10 menit | 1 |
Cathetan:
1) Panggunaan cithakan: 50-200 ng DNA genom;0,1-10 ng plasmid DNA.
2) Mg2+konsentrasi: Produk iki ngandhut 3 mM MgCl2 cocok kanggo paling reaksi PCR.
3) Suhu Annealing: Mangga deleng nilai Tm teoritis Primer.Suhu annealing bisa disetel dadi 2-5 ℃ luwih murah tinimbang nilai teoritis primer.
4) Wektu ekstensi: Kanggo identifikasi molekuler, dianjurake 30 sec/kb.Kanggo kloning gen, 60sec/kb dianjurake.
Cathetan
1.Kanggo safety lan kesehatan, mangga nganggo jas lab lan sarung tangan kanggo operasi.
2.Kanggo nggunakake riset mung!
