Siji Langkah Cepet RT-qPCR Probe Premix-UNG
Cat Nomer: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) yaiku kit deteksi cepet RT-qPCR berbasis probe sing cocok kanggo PCR kuantitatif siji-plex utawa multiplex nggunakake RNA minangka cithakan (kayata virus RNA).Produk iki nggunakake generasi anyar Taq DNA Polymerase sing dimodifikasi antibodi lan Transcriptase Reverse khusus siji-langkah, kanthi buffer sing dioptimalake kanggo amplifikasi kanthi cepet, sing nduweni kecepatan amplifikasi luwih cepet, efisiensi amplifikasi sing luwih dhuwur lan spesifik.Ndhukung amplifikasi imbang ing plex tunggal lan multipleks sampel konsentrasi rendah lan dhuwur ing wektu sing cendhak.
Komponen
1. 5×RT-qPCR buffer (U+)
2. Campuran enzim (U+)
Cathetan:
a.5×RT-qPCR buffer (U+)kalebu dNTP lan Mg2+;
b.Campuran enzim (U+) kalebu reverse transcriptase, Hot Start Taq DNA polymerase, inhibitor RNase lan UDG;
c.Gunakake tips RNase-Free, tabung EP, lsp.
Sadurunge nggunakake, sak tenane nyampur buffer 5 × RT-qPCR (U+).Yen ana udan sawise thawing, ngenteni buffer bali menyang suhu kamar, nyampur lan dissolve, banjur digunakake biasane.
Kahanan Panyimpenan
Prodhuk dikirim nganggo es garing lan bisa disimpen ing -25 ~ -15 ℃ suwene 1 taun.
instruksi
1. Reaksi Sistem
| Komponen | Volume (20 μL reaksi) |
| 2 ×RT-qPCR buffer | 4 μL |
| Campuran enzim (U+) | 0,8 μL |
| Primer Maju | 0,1 ~ 1,0μM |
| Primer Reverse | 0,1 ~ 1,0μM |
| TaqMan Probe | 0,05 ~ 0,25μM |
| Cithakan | X μL |
| Banyu Bebas RNase | iki 25μL |
Cathetan: Volume reaksi yaiku 10-50μL.
2. Protokol Sepeda (Standard)
| Sepeda; Pit; ontel langkah | Temp. | Wektu | Siklus |
| Reverse Transkripsi | 55 ℃ | 10 min | 1 |
| Denaturasi wiwitan | 95 ℃ | 30 sek | 1 |
| Denaturasi | 95 ℃ | 10 sek | 45 |
| Annealing / Extension | 60 ℃ | 30 sek |
| Protokol Cycling (cepet) Sepeda; Pit; ontel langkah |
Temp. |
Wektu |
Siklus |
| Reverse Transkripsi | 55 ℃ | 5 min | 1 |
| Denaturasi wiwitan | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Denaturasi | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Annealing / Extension | 60 ℃ | 10 s |
Cathetan:
a.Suhu transkripsi mbalikke antarane 50 ℃ nganti 60 ℃, nambah suhu mbantu nggedhekake struktur kompleks lan template konten CG sing dhuwur;
b.Suhu annealing optimal kudu diatur adhedhasar nilai Tm sepisanan, lan pilih wektu paling cendhak kanggo koleksi sinyal fluoresensi adhedhasar instrumen PCR Wektu Nyata.
Cathetan
Mangga nganggo PPE sing dibutuhake, jas lab lan sarung tangan, kanggo njamin kesehatan lan safety sampeyan!
