Ultra Nuclease GMP-grade
Cat Nomer: HC2016A
UltraNuclease GMP-grade wis ditulis lan diresiki ing Escherichia coli (E.coli) dening gen direkayasa lan disiapake ing lingkungan GMP.Bisa nyuda viskositas supernatant sel lan lysate sel ing riset ilmiah, nambah efisiensi pemurnian protein lan ningkatake riset fungsional protein.Produk kasebut uga bisa nyuda residu asam nukleat host dadi pg-grade, ningkatake kinerja lan safety produk biologi aplikasi kalebu pemurnian virus, manufaktur vaksin, lan manufaktur farmasi protein/polisakarida.Kajaba iku, produk kasebut uga bisa ditrapake kanggo nyegah clumping sel mononuklear getih perifer manungsa (PBMC) ing terapi sel lan pangembangan vaksin.
UltraNuclease disedhiyakake ing wangun reagen sing disterilisasi, diencerake ing buffer (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% gliserin), kanthi katon cairan transparan sing ora ana warna.Produk iki diprodhuksi miturut syarat proses GMP lan kasedhiya ing bentuk cair.
Komponen
UltraNuclease GMP-grade (250 U/μL)
Kahanan Panyimpenan
Prodhuk dikirim nganggo es garing lan bisa disimpen ing -25 ℃ ~ -15 ° C suwene rong taun.
Yen produk dibukak lan wis disimpen ing suhu 4 ℃ luwih saka seminggu, disaranake nyaringproduk kanggo nyegah kontaminasi mikroba.
Spesifikasi
| Host Ekspresi | E. coli rekombinan karo gen UltraNuclease |
| Bobot Molekul | 26,5 kDa |
| titik soelectric | 6.85 |
| Kemurnian | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Panyimpenan Buffer | 20mM Tris-HCL pH 8,0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% gliserin |
|
Definisi Unit | Définisi siji unit Aktivitas (U) yaiku jumlah enzim sing digunakakengganti nilai panyerepan ΔA260 kanthi 1,0 ing 30 menit ing 2. 625 mLsistem reaksi ing 37 ℃ kanthi pH 8,0 (setara karo pencernaan lengkap37 μg DNA sperma salmon dadi oligonukleotida). |
instruksi
1. Sampel Koleksi
Sel adherent: copot medium, cuci sel nganggo PBS, lan copot supernatan.
Sel suspensi: kumpulake sel kanthi sentrifugasi, cuci sel nganggo PBS, centrifuge ing 6.000rpm kanggo 10 menit, ngumpulake pelet.
Escherichia coli: kumpulake bakteri kanthi sentrifugasi, cuci sapisan nganggo PBS, centrifuge ing 8.000rpm kanggo 5 menit, lan ngumpulake pelet.
2. Perawatan Sampel
Nambani pelet sel sing diklumpukake kanthi buffer lisis kanthi rasio massa (g) kanggo volume (mL) 1: (10-20), utawa kanthi cara mekanik utawa kimia ing es utawa ing suhu kamar (1g pelet sel ngemot kira-kira.
109 sel).
3. Perawatan Enzim
Tambah 1-5mM MgCl menyang sistem reaksi lan atur pH dadi 8-9.
Tambah UltraNuclease miturut rasio 250 Unit kanggo nyerna 1 g pelet sel, inkubasi ing 37 ℃ luwih saka 30 menit.Mangga deleng formulir "Wektu Reaksi sing Disaranake" kanggo milihsuwene perawatan.
4. Supernatant Koleksi
Centrifuge ing 12.000 rpm kanggo 30 menit lan ngumpulake supernatant.
Cathetan: Yen solusi kasebut ngandhut asam utawa basa, utawa ngandhut uyah, deterjen, utawa konsentrasi dhuwurdenaturants, mangga nambah dosis enzim utawa ngluwihi wektu perawatan.
Rekomendasi kahanan reaksions
| Parameter | Kondisi Optimal | Kondisi Efektif |
| Mg² + Konsentrasi | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Suhu | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| Konsentrasi DTT | 0-100 mM | > 0 mM |
| Konsentrasi Mercaptoethanol | 0-100 mM | > 0 mM |
| Konsentrasi kation monovalen | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Konsentrasi Fosfat | 0-10 mM | 0-100 mM |
Dianjurake Reaksi Wektu (37 ℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Jumlah UltraNuclease (Konsentrasi Akhir) | Wektu Reaksi |
| 0,25 U/mL | > 10 jam |
| 2,5 U/mL | > 4 jam |
| 25 U/mL | 30 min |
Cathetan:
Mangga nganggo PPE sing dibutuhake, jas lab lan sarung tangan, kanggo njamin kesehatan lan safety sampeyan!
