Kit Ekstraksi DNA/RNA Virus
Kit iki cocok kanggo ekstraksi cepet DNA/RNA virus kanthi kemurnian dhuwur saka conto kayata swab nasofaring, swab lingkungan, supernatan kultur sel, lan supernatan homogenat jaringan.Kit kasebut adhedhasar teknologi pemurnian membran silika sing ngilangi kabutuhan nggunakake pelarut organik fenol / kloroform utawa udan alkohol sing akeh wektu kanggo ngekstrak DNA / RNA virus kanthi kualitas dhuwur.Asam nukleat sing dipikolehi bebas saka impurities lan siap digunakake ing eksperimen hilir kayata transkripsi terbalik, PCR, RT-PCR, PCR wektu nyata, urutan generasi sabanjure (NGS), lan Northern blot.
Kondisi panyimpenan
Simpen ing 15 ~ 25 ℃, lan transportasi ing suhu kamar
Komponen
| Komponen | 100RXNS |
| Buffer VL | 50 ml |
| Bunder RW | 120 ml |
| ddH2 O bebas RNase | 6 ml |
| Kolom RNA FastPure | 100 |
| Tabung Koleksi (2ml) | 100 |
| Tabung Koleksi Bebas RNase (1 .5ml) | 100 |
Buffer VL:Nyedhiyani lingkungan kanggo lysis lan naleni.
Buffer RW:Mbusak protein residual lan impurities liyane.
ddH2O bebas RNase:Elute DNA/RNA saka membran ing kolom spin.
Kolom RNA FastPure:Khusus adsorb DNA/RNA.
Tabung Koleksi 2 ml:Ngumpulake filtrat.
Tabung Koleksi Bebas RNase 1,5 ml:Ngumpulake DNA / RNA.
Aplikasi
Swab nasofaring, swab lingkungan, supernatan kultur sel, dan supernatan homogenat jaringan.
Mater sing disiapake dheweials
Tip pipet bebas RNase, tabung centrifuge bebas RNase 1,5 ml, centrifuge, mixer vortex, lan pipet.
Proses Eksperimen
Tindakake kabeh langkah ing ngisor iki ing kabinet biosafety.
1. Tambah 200 μl saka sampel menyang tabung centrifuge bebas RNase (make up karo PBS utawa 0,9% NaCl ing kasus sampel ora cukup), nambah 500 μl saka Buffer VL, nyampur uga kanthi vortexing kanggo 15 - 30 detik, lan centrifuge sedhela kanggo ngumpulake dicampur ing ngisor tabung.
2. Selehake FastPure RNA Columns ing tabung Koleksi 2 ml.Transfer campuran saka Langkah 1 menyang FastPure RNA Columns, centrifuge ing 12.000 rpm (13.400 × g) kanggo 1 menit, lan discard filtrate.
3. Tambah 600 μl Buffer RW menyang FastPure RNA Columns, centrifuge ing 12.000 rpm (13.400 × g) kanggo 30 detik, lan discard filtrate.
4. Baleni Langkah 3.
5. Centrifuge kolom kosong ing 12.000 rpm (13.400 × g) kanggo 2 min.
6. Kasebut kanthi teliti nransfer FastPure RNA Columns menyang anyar RNase-free Tabung Koleksi 1,5 ml (kasedhiya ing kit), lan nambah 30 - 50 μl RNase-free ddH2O menyang tengah membran tanpa ndemek kolom.Allow kanggo ngadeg ing suhu kamar kanggo 1 menit lan centrifuge ing 12.000 rpm (13.400 × g) kanggo 1 menit.
7. Buang FastPure RNA Columns.DNA/RNA bisa digunakake langsung kanggo tes sabanjure, utawa disimpen ing -30~ -15°C kanggo wektu sing cendhak utawa -85 ~-65°C kanggo wektu sing luwih suwe.
Cathetan
Kanggo nggunakake riset mung.Ora digunakake ing prosedur diagnostik.
1. Equilibrate conto kanggo suhu kamar ing advance.
2. Virus infèksius banget.Priksa manawa kabeh pancegahan safety sing dibutuhake ditindakake sadurunge eksperimen.
3. Ngindhari pembekuan lan thawing sampel sing bola-bali, amarga bisa nyebabake degradasi utawa nyuda ngasilake DNA/RNA virus sing diekstrak.
4. Peralatan sing disiapake dhewe kalebu tip pipet bebas RNase, tabung centrifuge bebas RNase 1,5 ml, centrifuge, mixer vortex, lan pipet.
5. Nalika nggunakake kit, nganggo jas lab, sarung tangan lateks nganggo, lan topeng nganggo lan gunakake bahan bakar tanpa RNase kanggo nyuda resiko kontaminasi RNase.
6. Nindakake kabeh langkah ing suhu kamar kajaba kasebut.
Mekanisme & Alur Kerja
