Multiplex qPCR Probe Premix
Cat Nomer: HCB5051A
TaqMan multiplex qPCR Master Mix (Dye Based) minangka solusi pra-solusi kanggo amplifikasi PCR kuantitatif wektu nyata 2 × sing ditondoi kanthi sensitivitas lan spesifisitas dhuwur, sing wernane biru, lan nduweni efek penambahan sampel.Prodhuk iki minangka reagen pra-campuran 2× Campuran sing mbisakake nganti papat reaksi PCR kuantitatif neon ing siji sumur reaksi.Produk iki ngemot cara antibodi sing diowahi sacara genetis kanggo enzim Taq wiwitan panas, ningkatake sensitivitas lan spesifisitas amplifikasi.Ing wektu sing padha, produk iki wis ngoptimalake buffer multi-reaksi kanthi jero, sing bisa ningkatake efisiensi amplifikasi reaksi lan ningkatake amplifikasi efektif cithakan konsentrasi rendah.Produk iki bisa digunakake kanggo analisis kuantitatif genotipe lan multipleks.
Spesifikasi
| Wiwitan Panas | Dibangun ing wiwitan panas |
| Metode deteksi | Deteksi primer-probe |
| metode PCR | qPCR |
| Polimerase | Taq DNA polimerase |
| Jinis sampel | DNA |
Kahanan Panyimpenan
Prodhuk dikirim nganggo es garing lan bisa disimpen ing -25 ~ -15 ℃ suwene 2 taun.
instruksi
1. ReaksiSistem
| Komponen | Volume (μL) | Konsentrasi pungkasan |
| 2 × TaqMan multiplex qPCR Master Mix | 12.5 | 1× |
| Campuran primer (10 μmol/L) a | × | 0,1 - 0,5 μmol / L |
| Campuran probe (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| Rox referensi pewarna | 0.5 | 1× |
| Cithakan DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | nganti 25 | - |
Cathetan:Nyampur sak tenane sadurunge digunakake kanggo ngindhari gelembung gedhe banget saka goyang kuat.
a.Konsentrasi primer: Campuran Primer ngemot pirang-pirang pasangan primer, biasane saben primer kanthi konsentrasi akhir 0,2 μmol/L lan uga bisa diatur antara 0,1 lan 0,5 μmol/L sing cocog.
b.Konsentrasi probe: Campuran Probe ngemot pirang-pirang probe kanthi sinyal fluoresensi sing beda, lan konsentrasi saben probe bisa diatur antarane 50 lan 250 nmol / L miturut kahanan tartamtu.
1.Referensi pewarna Rox: Digunakake ing instrumen amplifikasi PCR Wektu Nyata kayata Applied Biosystems kanggo mbenerake kesalahan sinyal fluoresensi sing diasilake ing antarane sumur;produk iki ora ngemot referensi pewarna Rox.Cas # 10200 dianjurake yen perlu.
2.Cithakan dilution: qPCR banget sensitif, lan dianjurake kanggo dilute cithakan kanggo nggunakake.Yen cithakan minangka solusi saham cDNA, volume cithakan ora ngluwihi 1/10 saka total volume.
3.Sistem reaksi: 25μL, 30μL utawa 50 μL dianjurake kanggo njamin efektifitas lan pengulangan amplifikasi gen target.
4.Persiapan sistem: Mangga nyiyapake ing bangku super resik, lan gunakake tips lan tabung reaksi tanpa residu nuklease;dianjurake kanggo nggunakake tips karo cartridges Filter.Ngindhari kontaminasi silang lan kontaminasi aerosol.
2.Program reaksi
| Siklus langkah | Temp. | Wektu | Siklus |
| Denaturasi wiwitan | 95 ℃ | 5 menit | 1 |
| Denaturasi | 95 ℃ | 15 sek | 45 |
| Annealing / Extension | 60 ℃ | 30 detik |
Cathetan:
1.Annealing / Extension: Suhu lan wektu bisa diatur kanthi tepat miturut nilai Tm primer sing dirancang.
2.Akuisisi sinyal fluoresensi: Wektu akuisisi sinyal fluoresensi sing dibutuhake kanggo instrumen deteksi qPCR beda-beda, mangga atur miturut watesan wektu minimal.Wektu sawetara instrumen umum disetel kaya ing ngisor iki:
20 detik: Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Cepet
31 detik: Applied Biosystems 7300
32 detik: Applied Biosystems 7500
Cathetan
Mangga nganggo PPE sing dibutuhake, jas lab lan sarung tangan, kanggo njamin kesehatan lan safety sampeyan!
