DNase I (Rnase Free)(5u/ul)
Cat Nomer: HC4007A
DNase I (Deoxyribonuclease I) minangka endodeoxyribonuclease sing bisa nyerna DNA untai tunggal utawa ganda.Iki ngenali lan mecah ikatan fosfodiester kanggo ngasilake monodeoxynucleotides utawa oligodeoxynucleotides untai tunggal utawa ganda karo gugus fosfat ing terminal 5' lan hidroksil ing terminal 3'.Aktivitas DNase I gumantung marang Ca2+lan bisa diaktifake dening ion logam divalen kayata Mn2+lan Zn2+.5 mM Ca2+nglindhungi enzim saka hidrolisis.Ing ngarsane Mg2+, enzim bisa kanthi acak ngenali lan mecah situs ing sembarang untaian DNA.Ing ngarsane Mn2+, untaian ganda DNA bisa bebarengan diakoni lan dibelah ing situs sing meh padha kanggo mbentuk fragmen DNA pungkasan sing rata utawa fragmen DNA pungkasan sing lengket kanthi 1-2 nukleotida sing metu.
Komponen
| jeneng | 0.1KU | 1KU | 5 KU | 50 KU |
| DNase I, bebas RNase | 20 μL | 200 μL | 1 ml | 10 ml |
| 10×DNase I Buffer | 1 ml | 1 ml | 5 × 1 ml | 5 × 10 ml |
Kondisi panyimpenan
-25 ℃ ~ -15 ℃ kanggo panyimpenan;Transport ing paket es.
instruksi
1. Siapke solusi reaksi ing tabung bebas RNase miturut proporsi ing ngisor iki:
| Komponen | Volume |
| RNA | X µg |
| 10 × DNase I Buffer | 1 μL |
| DNase I, bebas RNase (5U/μL) | 1 U saben µg RNA① |
| ddH2O | Nganti 10μL |
Cathetan: ①Hitung volume DNase I sing kudu ditambahake adhedhasar jumlah RNA.
2. 37 ℃ kanggo 15 menit;
3. Tambah 0.5M EDTA kanggo konsentrasi final saka 2.5mM ~ 5mM, lan panas ing 65 ℃ kanggo 10 menit kanggo mungkasi reaksi.Sampel bisa langsung digunakake kanggo reaksi sabanjure kayata transkripsi mbalikkeeksperimen.
Definisi Unit
Siji unit ditetepake minangka jumlah enzim sing bakal ngilangi 1µg pBR322 kanthi lengkapDNA ing 10 menit ing 37 ℃.
Kontrol kualitas
RNase:5U saka DNase I kanthi 1.6µg MS2 RNA suwene 4 jam ing 37 ℃ ora ngasilake degradasi minangkaditemtokake dening elektroforesis gel agarose.
Cathetan
1. Mangga nyiyapake 0.5MEDTA dhewe.
2. Gunakake 1U DNase I saben µg RNA.Nanging, yen RNA kurang saka 1µg, gunakake 1U DNase I.
3. Mangga nyelehake enzim ing es sajrone operasi.
